Siekalu kortizola noteikšana ar augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfiju (AEŠH)
Pamatinformācija
Pieaugot darba intensitātei un prasībām, darbiniekiem būtiski pieaug arī psihoemocionālo risku radītie veselības traucējumi. Kā viena no psihoemocionālo riska faktoru izpausmēm jāmin stress. Palielinoties stresam, organisms pastiprināti izdala hormonus - adrenalīnu, noradrenalīnu un kortizolu, kas paaugstina glikozes līmeni asinīs. Šāda reakcija palīdz cilvēkam iegūt nepieciešamo enerģiju stresa pārvarēšanai. Tomēr ilgstoša stresa ietekme rada būtiskas kortizola novirzes diennakts ciklā, tādējādi veicinot miega traucējumus, darba spēju izsīkumu un pašvērtējuma samazināšanos, kā arī biežākus darba kavējumus.
Stress ir otra visbiežāk izplatītā ar darbu saistītā veselības problēma, kas skar 22 % darbinieku Eiropas Savienības dalībvalstīs (Eiropas statistikas dati).
Metodes
Darba mērķis ir izveidot pietiekami vieglu, ar labu atkārtojamību cilvēku siekalu kortizola noteikšanas metodi ar augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfiju (AEŠH) ar UV detektoru laboratorijas apstākļos, kā arī analizēt biroju darba vidē strādojošo siekalu kortizola paraugu koncentrācijas.
Par kortizola AEŠH metodes labākajiem apstākļiem eksperimentāli tika noteikti:
• UV absorbcijas viļņa garums: 254 nm;
• kolonnas mobilā fāze (izokrātiska sistēma): acetonitrils: ūdens;
• temperatūra: 30 ºC;
• analīzes laiks: 12 min;
• mobilās fāzes plūsmas ātrums: 1 mL/min;
• parauga injekcijas tilpums: 100 µL;
• iekšējais standarts – 6α-metilprednizolons.
Rezultāti
Kortizola metodes jutība ir 0,011 laukuma vienības/nmol. Noteiktā metodes atgūstamība: 96,4 ± 6,21 %.
Darba procesā analizētas aptuveni 190 biroju darba vidē strādājošu cilvēku siekalu kortizola paraugu koncentrācijas. Siekalu paraugi kortizola koncentrācijas noteikšanai iegūti trīs dažādos dienas laikos (no rīta, pusdienlaikā un pēcpusdienā), lai pārbaudītu koncentrācijas izmaiņas atbilstoši kortizola diennakts ritmam.
Secinājumi
Izstrādāta siekalu kortizola noteikšanas AEŠH metode ar labiem metodes validācijas datiem.
Vidējais noteiktais siekalu kortizola paraugu koncentrācijas diapazons darba dienas laikā ir 2,4 – 16 nmol/L. No rīta tas ir visaugstākais ( vidēji 9,7 nmol/L), dienas laikā tam pakapēniski samazinoties (pusdienlaikā – 8,0 nmol/L, bet pēcpusdienā – 5,9 nmol/L).
